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斑贴试验在皮肤科学中的应用已有100年的历史,对接触性皮炎及某些过敏性皮肤病诊断的可靠性已得到了充分证明。斑贴试验的应用促进了接触性皮炎与皮肤变态反应学科的发展。目前斑贴试验技术是皮肤科医师需具备的基本技能之一。
斑贴试验的目的及原理:
目的:1.诊断接触性皮炎、变态反应性药物反应、真菌变态反应以及食物变态反应等变态反应性皮肤病;
2.寻找引起过敏的致敏原;
3.指导临床选择相应代替物并采取保护性措施。
原理:将可疑致敏物质敷贴于患者皮肤上,通过皮肤或粘膜进入机体后由抗原呈递细胞将抗原呈递给T淋巴细胞,使特异性T淋巴细胞活化,诱发炎症反应。
适应证:(1) 接触性皮炎、湿疹、职业性皮肤病等因接触某些物质引起的变态反应发生的皮肤病。
(2)当病因不明或有数种物质接触,需要寻找病因时,可做斑贴试验。
斑贴试验的变应原:斑贴试验所用变应原可分为市售变应原及自制变应原两类。常规斑贴试验变应原主要从市场上购得。
(一)市售变应原 可以分为标准变应原系列、筛选变应原系列及后备变应原系列。
1.标准变应原系列是由某一国家或地区内常见的变应原组成,可以对60%~80%接触性皮炎提供线索。我国目前还没有公认的标准变应原系列,使用的是瑞典生产的标准变应原系列。
2.筛选变应原系列是针对某一职业或某一物质进行变应原筛选所用,由某一特殊职业人群或某一类特殊物质中常见的变应原组成。
3.后备变应原系列指标准变应原系列和筛选变应原系列以外的常见变应原,主要用于怀疑对某种特殊物质过敏时应用。
(二)自制变应原 自然界里可能存在着无数种变应原,1986年Groot总结报告了2800种接触变应原,而且新的变应原每年都有发现,市售变应原远不能满足接触性皮炎实际工作的要求,皮肤科医师还应学会自制变应原。
斑贴试验的测试系统、操作步骤及结果判定:
(一).测试系统:
现有的测试系统分为原始分离系统(separate system)、改良分离系统及现代直接用系统(ready-to-use system)。
1.原始分离系统为早期斑贴试验常用方法,由斑试器、变应原和胶带组成。试验前操作者需将变应原自容器中挤出到斑试器内。
2. 改良分离系统是对原始分离系统进行了改良形成的半直接用系统。操作者可以将变应原预先放入斑贴试验小室内,再将小室封好,备用,试验时不必现加变应原。
3.直接用系统如TRUE TEST斑贴试剂,其斑试器、变应原和胶带一体化,试验时将变应原胶带取出,去掉封带,直接贴与患者身体使用。此试剂在国外应用多年,我国初步临床试验表明安全可靠,有很高特异性及敏感性,适合我国应用。
(二)操作步骤
在分离系统中,将自注射器或小瓶中变应原挤出到斑试器内,液体变应原则需先在斑试器内放置一滤纸,然后滴加变应原,量以能接触皮肤又不溢出斑试器为度。最后将斑试器贴于受试者上背部,做好标记。直接用系统中,只需把遮盖层揭掉,直接贴敷。
贴敷部位:背部,也可选上臂外侧。上臂内侧、股部、腿部由于吸收不良不应斑贴试验。
(三)结果判定
判断方法多为两次判读法。在贴敷48h后,将斑贴物除去,进行第一次判读,去除后的48~96h,进行第二次判读。(判读应在去除斑试器20~30 min后进行,以排除因测试系统压迫等因素造成的非特异性刺激反应,并使阳性反应更明显。)
如果只能判读一次,让患者在贴敷48h自行去除,然后在去除后24h就诊,判读结果。
阴性反应皮肤无任何改变。
根据ICDRG(international contact dermatitis research group)的推荐,斑贴试验阳性结果的记录见表1。
表1 ICDRG推荐斑贴试验结果记录方法
代号 中文名称 皮肤表现
± 可疑阳性 仅有轻度红斑
+ 弱阳性 红斑、浸润,可有少量丘疹
++ 强阳性 红斑、浸润、丘疹、水疱
+++ 极强阳性 红斑、浸润明显,有水疱大疱
IR 刺激反应
NT 未试验
斑贴试验结果判读由专人进行,并在判断结果后,对变应原的分布及患者的进一步治疗负责,使试验观察及诊断、治疗一体化。
临床意义:
阳性反应:说明患者对受试物过敏,但应排除假阳性和原发性刺激;
阴性反应:表示患者对试验物无敏感性;
阳性与假阳性的鉴别:除去受试物24-48小时内反应一般是增强的而不是减弱为阳性;一旦把受试物除去,反应很快消失为假阳性。
假阴性和假阳性:
在斑贴试验结果的判断中,需要注意假阴性和假阳性反应。假阳性及假阴性反应因素如下:
常见假阳性因素:
1.变应原浓度高;
2.基质不合适,变应原吸收太多或基质反应;
3.局部高反应性(可由于既往在试验部位致敏所致或特应性体质,光损伤性皮肤等);
4.用刺激物测试;
5.胶布反应;
6.仅判读48小时;
7.人工因素 如搔抓。
常见假阴性因素:
1.变应原浓度低或用量不足;
2.基质或配置方法不合适,变应原或吸收差;
3.局部用药或全身紫外线照射等因素造成免疫抑制;
4.系复合物反应;
5.胶带粘贴不牢或脱落;
6.迟发反应,判读时间不够长;
7.变应原失效。
刺激性反应与变态反应的鉴别:
正确判读斑贴试验结果必须首先鉴别刺激性反应与变态反应,两者之间的意义大不一样。刺激性反应是由非免疫性机制造成的皮肤反应,说明了某物质对患者皮肤有刺激,当降低浓度或改变其它条件时,患者仍可以接触该物质;而变态反应意味着患者哪怕接触极微量的某物质也可能发生反应,因此在生活工作中应严格避免直接接触此物质。根据国内外研究,斑贴试验刺激性反应与变态反应的鉴别如下:
刺激性反应的特点:
1.可以表现与变态反应完全相同,不同的是可出现脓疱、坏死、紫癜及溃疡。表皮细小起皱也是其特征性表现;
2. 边界极清;
3. 无沿淋巴管扩展呈细红线状;
4. 瘙痒少见,可有痛感及烧灼感;
5. 皮疹到第四天多消退;
6. 反应程度不呈梯度变化,可以在某个浓度突然消失。
变态反应的特点:
1.红斑为隆起性,可触及并有水疱;
2.边界不清,可扩展至斑试器外;
3.可沿淋巴管扩展呈细红线状;
4.瘙痒明显;
5.皮疹持续4天或更长;
6.变应原浓度呈梯度变化时,反应程度也呈梯度变化。
开放试验及反复开放应用试验:
1.开放试验又称应用试验,主要针对未知的非标准变应原斑贴试验前的测试。
方法:对病人带来的可疑过敏性物质,将原物或将其融解后滴加于前臂屈侧,让其自然扩散挥发,在30~60min内定期观察,以发现速发型接触性反应。3~4天后进行最后判读,如阴性可进行常规斑贴试验。若斑贴试验阴性而又高度怀疑过敏的物质,可将可疑物品直接模仿患者实际使用时的状况,观察其反应。
适应证:(1)高度怀疑化妆品等过敏而斑贴试验可疑或阴性的反应者(2)未知的或新的变应性抗原
2.反复开放应用试验 主要对斑贴试验结果怀疑时使用,方法:将可疑变应原涂于前臂屈侧近肘窝处约5cm×5cm大的皮肤上,受试物0.1~0.5ml左右,每日涂2次,连续7天。阳性反应通常在2~4天出现,表现为湿疹样。在阳性反应出现同时,告知患者停止使用外涂受试物。
光斑贴试验:
光斑贴试验(photopatch testing)主要是用于光变应性接触性皮炎的诊断。用于检测接触性光变应原。由于临床上与日光有关的皮肤炎症很多,均表现为日光暴露部位的皮炎,因此合理的光斑贴试验对于查找接触光变应原有重要意义。
适应证:适用于临床上病因不明的日光相关性皮肤病的鉴别诊断,用于明确诊断光变应性接触性皮炎,确定光变应原,从而根治该病。
测试系统:除常规斑贴试验所需物品如光变应原及斑试器外,光斑贴试验尚需特制光源。常规光斑贴试验的光源均为UVA,特殊情况下可见光,红外线等均可能引发光敏感也需要测试。
试验方法:光斑贴试验的光变应原贴敷方法同常规斑贴试验,但是光斑贴试验的物质在背部两侧平行贴完全相同的两列。其中一列在测试过程种始终避光,在贴敷2天后于暗处去除,并判读后仍避光,其目的为检测变应性接触性反应。另一列在贴敷1~2天后去除判读,后照射UVA20~30min,照射后避光,24~48h后判读结果。
具体操作程序:
1.第一天,给患贴敷变应原,并照射UVA,UVB以测定最小红斑量(MED);
2.测量最小红斑量数据,一列变应原进行UVA照射或在第三天照射;
3.第三天两列均去除斑试物,判读结果;
4.第五天,第二次判读结果。
结果判读:
1.未照射区皮肤无反应,而照射区有反应者为光斑贴试验阳性;
2.如果两侧反应相同,则仍记录为一般接触性过敏;
3.如果两侧均为阳性,但照射区强度大,则考虑为接触过敏或光过敏共存;
4.注意与光毒性反应区别,必要时可用变应原浓度梯度测试试验帮助鉴别,被检物质即是光感物质在亚红斑量照射处发生的晒斑样反应为光毒性反应。
5.光变态反应强度随变应原浓度呈梯度变化且在低浓度仍有反应。
温馨提示
1.斑试前应向受试者说明意义和可能出现的反应,以便取得合作。
2.皮炎急性期不宜做斑贴试验,也不宜用高浓度的原发刺激物试验.
3.夏季酷暑不宜做皮肤斑贴试验。
4.如试验处感到重度烧灼或剧痒,应及时终止。
5.斑试期间要保持局部干燥,不要挪动斑试器,防止脱落,不宜洗澡或做易出汗的活动。
6.试验前、受试期间受试者应避免服用抗炎性介质类药物如糖皮质激素、抗组织胺药等。
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