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如何制作皮肤的石蜡切片
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一 皮肤组织标本制作及常用染色方法概述
皮肤组织标本常规以福尔马林固定,石蜡包埋,苏木素-伊红(Hematoxylin eosin HE)染色。皮肤组织的制片及染色技术与普通病理相同:标本固定-水洗-硬化、脱水-透明-包埋-切片-染色。但皮肤组织亦有其自身特点,如表皮细胞层次多,纤维及脂肪组织丰富,在取材及固定方面有其特殊性,制片及染色过程也应注意其特点,以提高制片质量。
二 取材
a取材要足够大,应包括一小部分正常组织,以便与病理组织对照,因许多皮肤病的典型病变在真皮深层或皮下组织,故还应包括皮下组织,
b多数情况下应选择充分发展的损害,早期损害常为非特异性,晚期损害的病变大都处于恢复或变性、坏死阶段,充分发展的损害容易找到典型病变而明确诊断,还应尽量选择损害的活动边缘部分,中央部分可能病变已趋向于消退而找不出典型病变。对于水疱性、脓疱性以及含有病原体的损害应取早期损害,否则,若发生继发性改变(如变性、再生或继发性感染)可能隐蔽了重要病变的组织形态,同时,很难辨别病变形成的过程,
c尽量避免切除腋窝或腹股沟等部位皮肤组织,因该处皮肤由于磨擦,搔抓等常有萎缩,
d如疑有血管性或血液性疾患,最好不要取下肢标本,因下肢常有血液停滞或其它肢端血管病,皮内可能有含铁血黄素沉着,
e对某些肿瘤,如角化棘皮瘤,Spitz痣等,应尽可能将肿瘤全部切除,若不能全部切除,则最好自肿瘤中心至边缘取一楔形标本,以供组织学检查。
三 固定
切下皮肤愈早固定愈好,夏天超过4小时,冬天超过24小时,标本体积就要收缩变形或发生自溶。常用固定液为10%中性福尔马林,其总体积应为组织块总体积的7~10倍,用10%福尔马林固定小块组织(1.5 cm×1.5 cm×0.2cm)数小时即可,时间稍长对制片影响不大,随着温度的增高可缩短固定时间,对固定时间过长的标本,可在制作切片时,用流水冲洗24小时,甚至48小时,以免影响染色效果。
四 脱水、包埋、切片及染色
皮肤组织常用酒精脱水、二甲苯透明、石蜡包埋,切片厚度一般为5μm~7μm,与普通病理切片操作程序相同。HE染色法方便、经济,结果稳定,95%以上的组织切片都可以在HE染色下作出诊断,是皮肤组织病理最常用的方法。

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