神经干细胞移植治疗缺血性脑卒中（脑中风）的研究（二）

　　3 讨论
　　3．1 细胞移植治疗脑卒中的机制和途径无论是将细胞移植到脑卒中损伤同侧还是对侧半球，细胞都并不是仅仅存在于注射位点或注射侧半球，而是分布于病灶侧和健侧半球。这说明细胞不止接受脑卒中直接损伤所产生的信号的指引，还接受健侧半球神经支配和重组。因此，其神经修复的机制可能包括：① 移植的细胞迁移到损伤侧，重建局部环路，这些环路足够保持某些功能；② 移植细胞扩大健侧半球的自发重组，行使或弥补损伤侧半球丧失的某些功能。在早期阶段，神经功能改善可能主要是由于移植的细胞产生的营养因子在发挥作用；而在晚期阶段，神经功能改善可能主要是由于移植的细胞替代变性的宿主细胞发挥作用。骨髓基质细胞可能主要是由于其分泌的神经营养因子和细胞外基质的作用；而神经干细胞可能是以替代损伤神经元、重建环路为主。

　　3．2 神经干细胞移植时间 急性脑梗死，由于存在严重的动脉阻塞，缺少血液供应，会影响移植物的存活。L i等研究发现局灶性脑梗死后，缺血半暗区的细胞凋亡持续存在4周。这说明缺血性损伤是一个进展的过程。在这期间，将细胞移植到病灶周围，兴奋性毒性神经递质、自由基、前炎症介质可能威胁移植的细胞。因此，移植时间的选择必须考虑脑卒中恢复的自然过程，许多研究者延迟移植时间一直到功能缺损达到平台期。然而，过分延长移植的等待时间，会导致瘢痕组织的形成，而这又不利于移植。Eriksson等 ]认为脑损伤当时的微环境不利于移植细胞的存活，可能是低氧等不利因素所致。同时，这种微环境随着时间的延长而逐渐改善。也有人认为缺氧、缺血损伤期间或损伤后尽早进行干细胞移植有效，而对缺血性脑卒中后神经干细胞移植的研究却发现移植与损伤间隔7 d左右时移植细胞存活率最高，可能与此时的神经毒性物质减少，神经营养因子释放和血管发生有关[6]。我们认为，卒中3 d后移植较合适。本C组NSS评分最低。

　　影响神经干细胞移植疗效的具体机制目前尚未明确，考虑可能与多因素(除移植时间外还可能与移植位点 、移植细胞量 。 等)有关。在本实验中，我们在不同时间采用立体定向移植到大鼠的脑缺血区域，并且移植后对大鼠的功能恢复进行评价，免疫组织化学方法染色检查存活的细胞。显示了神经干细胞具有减轻缺血后神经功能损害的作用，并且我们认为在早期移植具有最佳的效果。首先，B、C、D组NSS评分明显低于A 组，说明神经干细胞在宿主脑内迁移和分化；其次，C组的NSS评分低于B、D组，说明脑损伤后早期的微环境较利于移植细胞的存活。